9月9日,由我司主辦的2015年達科為生物第三屆流式培訓(xùn)班——上海分站理論課程在上海交大醫(yī)學(xué)院西2教學(xué)樓401室進行第二天。
上午8點半課程開始,首先是復(fù)旦大學(xué)免疫系儲以微教授課題組汪路曼博士以流式分析在B細(xì)胞分型中的應(yīng)用為題目做報告,介紹B細(xì)胞分選,淋系淋巴細(xì)胞分化,B細(xì)胞分型,B細(xì)胞FACS,B細(xì)胞在刺激下的分化,調(diào)節(jié)性B細(xì)胞等。主要講解兩個課題內(nèi)容:一、甲狀腺病人、GD病人中調(diào)節(jié)性B細(xì)胞IL-10陽性細(xì)胞降低,通過研究確定CD27和CD24陽性亞群在GD中的作用 ;二、炎癥性腸病和B細(xì)胞影響的研究,先發(fā)現(xiàn)B細(xì)胞對IBD的緩解作用,通過幾個實驗的研究結(jié)果得到了B細(xì)胞通過細(xì)胞接觸促Treg來緩解炎癥,Treg通過細(xì)胞因子的作用來促進B細(xì)胞IgA分泌的結(jié)論。
汪路曼博士 陳旭峰博士
中科院生化細(xì)胞所劉小龍教授課題組陳旭峰博士講解多色流式細(xì)胞術(shù)的原理、技術(shù)特點以及其優(yōu)缺點,并結(jié)合自己的實際案例給大家展示多色流式細(xì)胞術(shù)實際應(yīng)用中的基本流程。同時,陳博士還給大家介紹多色流式細(xì)胞術(shù)在造血干細(xì)胞的分析純化、磷酸化研究、周期凋亡研究以及移植等多個方面的實際應(yīng)用。最后,向大家闡述多色細(xì)胞術(shù)的一些注意事項。
上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院上海市免疫學(xué)研究所陳穎盈博士闡述結(jié)核病,流行病學(xué)分布,結(jié)核菌生活史,講解她在結(jié)核病疫苗研究中的研究結(jié)果。她篩查了90多個抗原,8個為候選疫苗抗原,以31號抗原為例,先克隆DNA,后表達蛋白,然后用ELISPOT檢測免疫性,小鼠吸入后4周血清學(xué)診斷發(fā)現(xiàn)其可以達到免疫水平,并檢測脾臟中細(xì)胞因子gamma干擾素、IL-2、TNF-alpha的分泌量,分選出CD4和CD8進行刺激,比較對照組和實驗組3個因子的變化,發(fā)現(xiàn)31號抗原免疫后誘導(dǎo)產(chǎn)生T細(xì)胞多為多能T細(xì)胞,即分泌2-3種上述細(xì)胞因子31號抗原較好的誘導(dǎo)了免疫。
陳穎盈博士 伍寧波博士
上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院上海市免疫學(xué)研究所伍寧波博士分享流式多色技術(shù)在T細(xì)胞發(fā)育檢測中的應(yīng)用,說明了流式多色技術(shù)的重要性。伍博士以自己的實驗為例,與學(xué)員們交流多色流式技術(shù)中marker選擇、熒光素和marker搭配原則及補償調(diào)節(jié)等方面的具體問題。
接下來,依次由耐細(xì)隆生物儀器(上海)有限公司應(yīng)用科學(xué)家李如偉博士講解熒光核染技術(shù)的應(yīng)用——原代細(xì)胞的精確計數(shù)及細(xì)胞計數(shù)儀的相關(guān)內(nèi)容;Elispot產(chǎn)品專家周翔介紹達優(yōu)ELISPOT全線產(chǎn)品以及達科為技術(shù)團隊王婷婷講解BioLegend流式多色配色的相關(guān)內(nèi)容。
充實而精彩的兩天理論課程很快結(jié)束了,接下來的兩天我們將帶領(lǐng)參加實驗操作的學(xué)員走進實驗室,親自體驗8色流式實驗檢測的全過程!