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嘿！PTM ! 我抓住你啦！
*偷偷告訴你：文末有驚喜！?。?/span>
PTM全稱Post-translationalmodification，即翻譯后修飾，是蛋白質(zhì)生物合成過(guò)程的較后步驟。PTM之于蛋白質(zhì)，有點(diǎn)像PS之于照片，經(jīng)過(guò)PTM的蛋白質(zhì)會(huì)有不同的樣子和功能。
今天給大家介紹一款很厲害的試劑盒，能夠準(zhǔn)確高效的提取并富集不同的PTM，方便您的后續(xù)研究~
蛋白質(zhì)是生命活動(dòng)的主要承擔(dān)者，蛋白質(zhì)層面的研究，最常被關(guān)注的就是蛋白表達(dá)量的改變。然而，蛋白表達(dá)量高低的調(diào)控形式過(guò)于單一，難以滿足生物體如此復(fù)雜的運(yùn)行要求。
那么如何解決這個(gè)問(wèn)題呢？別急，大自然早就為蛋白質(zhì)加好了buff~ 這個(gè)buff就是PTM, 蛋白質(zhì)的翻譯后修飾。
蛋白質(zhì)的翻譯后修飾(Proteinpost-translational modification, PTM)是一項(xiàng)重要的技能，是指在蛋白質(zhì)的氨基酸側(cè)鏈上共價(jià)結(jié)合化學(xué)小分子基團(tuán)，例如我們最了解的磷酸化修飾：
據(jù)估計(jì)，哺乳動(dòng)物含有數(shù)百萬(wàn)種獨(dú)特的蛋白質(zhì)組但其卻源于一個(gè)相對(duì)簡(jiǎn)單的基因組（約25000個(gè)基因），蛋白質(zhì)組的復(fù)雜程度和蛋白質(zhì)功能的多樣性都要?dú)w功于PTM。
目前已知的PTM的種類(lèi)超過(guò)400種，幾乎所有的蛋白質(zhì)均可發(fā)生PTM。并且，同一個(gè)蛋白質(zhì)還可同時(shí)具有多種PTM。蛋白發(fā)生PTM后，會(huì)顯著改變其理化性質(zhì)和構(gòu)象，從而直接改變蛋白的結(jié)合能力與功能。因此,即使蛋白本身的表達(dá)水平?jīng)]有改變，但如果翻譯后修飾的狀態(tài)發(fā)生改變，蛋白的功能也會(huì)顯著變化。
在PTM這個(gè)超級(jí)buff的加持下，蛋白質(zhì)的種類(lèi)和功能都得到了指數(shù)級(jí)擴(kuò)增。
下圖以中間絲蛋白（IF）為例,描述了針對(duì)于IF的各種不同PTM對(duì)于其蛋白功能的影響：
盡管目前已知的PTM的種類(lèi)超過(guò)400種，但只有少數(shù)幾個(gè)被詳細(xì)研究過(guò)，主要包括甲基化、磷酸化、乙?；⒎核鼗?/span>SUMO化，它們被證明是幾乎所有細(xì)胞的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因素，包括信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、表觀遺傳學(xué)、基因和蛋白質(zhì)表達(dá)、蛋白質(zhì)穩(wěn)定性和定位以及細(xì)胞免疫。
目前主要研究的PTM及其作用和特點(diǎn)
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PTM類(lèi)別 |
已發(fā)表作用 |
新發(fā)現(xiàn)作用 |
目標(biāo)氨基酸 |
修飾物 |
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甲基化 |
表觀調(diào)節(jié) |
蛋白質(zhì)互作，信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) |
R, K |
甲基轉(zhuǎn)移酶, 去甲基化酶 |
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磷酸化 |
信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) |
蛋白質(zhì)互作，表觀調(diào)節(jié) |
Y, S, T |
激酶，磷酸酶 |
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乙?；?/span> |
表觀和代謝調(diào)節(jié) |
蛋白質(zhì)穩(wěn)定性、定位、合成 |
K |
乙?；?， 去乙?；?/span> |
|
泛素化 |
蛋白酶體靶向-降解 |
蛋白質(zhì)定位，蛋白質(zhì)互作 |
K |
泛素連接酶, 去泛素化酶 |
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SUMO化 |
核蛋白定位，轉(zhuǎn)錄活性 |
蛋白質(zhì)穩(wěn)定性、應(yīng)激反應(yīng)、細(xì)胞周期 |
K |
SAE, ubc9, SENP |
蛋白修飾及功能的多樣性是維持機(jī)體復(fù)雜精準(zhǔn)調(diào)控的基礎(chǔ)，但同時(shí)也給研究PTM的科研人員的研究造成了很多的困擾。
為什么蛋白質(zhì)翻譯后修飾的鑒定難度要遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于未發(fā)生修飾的蛋白質(zhì)的鑒定，主要有以下幾點(diǎn)原因：
-
發(fā)生翻譯后修飾的蛋白質(zhì)樣本量相對(duì)較少；
-
發(fā)生修飾時(shí)形成的共價(jià)鍵非常不穩(wěn)定，且處于動(dòng)態(tài)變化中 ；
-
修飾與未修飾的蛋白及多種修飾形式的蛋白常混合存在 。
針對(duì)這些困擾，Cytoskeleton公司開(kāi)發(fā)了一系列名為 Signal-Seeker? 的試劑盒，用于研究各種蛋白翻譯后修飾。
Signal-Seeker? 試劑盒使用親和磁珠從任何給定的細(xì)胞或組織裂解液中提取并富集修飾蛋白，然后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)的Western blot程序分析濃縮蛋白群，最終用戶使用自身的抗體檢測(cè)所需的修飾蛋白。
Signal-Seeker?試劑盒檢測(cè)流程如下圖
Signal-Seeker?試劑盒的特點(diǎn)和優(yōu)勢(shì)
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Signal-Seeker?試劑盒配套相應(yīng)的抗體，能對(duì)任意蛋白的轉(zhuǎn)錄后修飾進(jìn)行研究；
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Signal-Seeker?試劑盒提供通用的裂解過(guò)濾系統(tǒng)及定量工具，能輕松從給定的細(xì)胞或組織裂解液中提取蛋白并進(jìn)行總蛋白的定量；
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Signal-Seeker?親和磁珠，富集效果無(wú)與倫比，配合對(duì)照磁珠，提供PTM蛋白精準(zhǔn)定量；
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Signal-Seeker?親和磁珠可用于捕獲PTM修飾的蛋白，然后用于進(jìn)行進(jìn)一步的分析（如Westernblot和質(zhì)譜檢測(cè)）；
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關(guān)鍵的去修飾化抑制劑，防止檢測(cè)過(guò)程中的去修飾；
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Signal-Seeker?kit可以用于研究多重PTM的串?dāng)_（例如目標(biāo)蛋白的泛素化和乙?；?；
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市面上最全面的PTM試劑盒：包括通用裂解過(guò)濾系統(tǒng)、蛋白質(zhì)定量工具、IP濃縮試劑、洗滌試劑、洗脫試劑、化學(xué)發(fā)光試劑。
Signal-Seeker?試劑盒應(yīng)用實(shí)例
Signal-Seeker?試劑盒研究Rac1蛋白的單泛素化和多元泛素化
用MG-132預(yù)處理Swiss 3T3 細(xì)胞，然后添加/不添加CNF1 (cat# CN04)處理3h，用BK161 kit來(lái)進(jìn)行 IP，裂解液上樣量300 μg /次。
Lane 1: 3 μg 未處理的裂解液；
Lane 2: Ubiquitin親和磁珠(cat# UBA01) +未處理的裂解液；
Lane 3: UBA01 + CN04處理的裂解液；
Lane 4: Ubiquitin 對(duì)照磁珠(cat# CUB02) +未處理的裂解液；
Lane 5: CUB02 + CN04處理的裂解液.
*注：用細(xì)菌毒素CNF1(cat#CN04)處理細(xì)胞會(huì)導(dǎo)致Rac1的組成性激活，并隨后導(dǎo)致單泛素化和多泛素化。
可以看到，未經(jīng)修飾的Rac1與泛素親和珠和泛素對(duì)照珠（lane 2-5）發(fā)生非特異性相互作用；然而，單泛素化和多泛素化Rac1僅與泛素親和珠（lane 3）結(jié)合，而與泛素對(duì)照珠（lane 5）不結(jié)合。所以建議用戶在實(shí)驗(yàn)時(shí)使用適當(dāng)?shù)膶?duì)照珠來(lái)幫助區(qū)分未修飾的目標(biāo)蛋白帶。
為了幫助大家更好的抓住PTM并且研究它們，現(xiàn)在Cytoskeleton公司對(duì)以下PTM研究相關(guān)產(chǎn)品進(jìn)行促銷(xiāo)：
即日起至2019.6.30，
購(gòu)買(mǎi)以下任意產(chǎn)品均可享受7折優(yōu)惠，
不要錯(cuò)過(guò)哦~
此次促銷(xiāo)產(chǎn)品清單如下
Signal-Seeker?試劑盒
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BK160 |
Signal-Seeker? Phosphotyrosine Enrichment Kit |
KIT 30 assays |
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BK160-S |
Signal-Seeker? Phosphotyrosine Enrichment Kit |
KIT 10 assays |
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BK161 |
Signal-Seeker? Ubiquitin Enrichment Kit |
KIT 30 assays |
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BK161-S |
Signal-Seeker? Ubiquitin Enrichment Kit |
KIT 10 assays |
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BK162 |
Signal-Seeker? SUMOylation Enrichment Kit |
KIT 30 assays |
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BK162-S |
Signal-Seeker? SUMOylation Enrichment Kit |
KIT 10 assays |
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BK163 |
Signal-Seeker? Acetyl-Lysine Enrichment Kit |
KIT 30 assays |
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BK163-S |
Signal-Seeker? Acetyl-Lysine Enrichment Kit |
KIT 10 assays |
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BK165 |
Signal-Seeker? SUMOylation-1 Enrichment Kit |
KIT 30 assays |
|
BK165-S |
Signal-Seeker? SUMOylation-1 Enrichment Kit |
KIT 10 assays |
乙?；贵w
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AAC01 |
Anti-Acetyl Lysine Mouse Monoclonal Antibody (3C6.08.20) |
2 x 100 μl |
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AAC01-S |
Anti-Acetyl Lysine Mouse Monoclonal Antibody (3C6.08.20) |
1 x 25 μl |
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AAC02 |
Anti-Acetyl Lysine Mouse Monoclonal Antibody (7B5A1) |
2 x 100 μl |
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AAC02-S |
Anti-Acetyl Lysine Mouse Monoclonal Antibody (7B5A1) |
1 x 25 ul |
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AAC03 |
Anti-Acetyl Lysine Mouse Monoclonal Antibody (19C4B2.1) |
2 x 100 μl |
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AAC03-S |
Anti-Acetyl Lysine Mouse Monoclonal Antibody (19C4B2.1) |
1 x 25 ul |
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AAC03-HRP |
Anti-Acetyl Lysine Mouse Monoclonal Antibody HRP Conjugates |
1 x 100 μl |
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AAC03-HRP-S |
Anti-Acetyl Lysine Mouse Monoclonal Antibody HRP Conjugates |
1 x 25 ul |
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AAC04-beads |
Anti-Acetyl Lysine Mouse Monoclonal Antibody Agarose Conjugates |
4 x 500 μl |
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AACX1 |
Chemically Acetylated Bovine Serum Albumin (BSA) |
1 x 500 μg |
磷酸化抗體
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APY03 |
Anti-Phosphotyrosine Mouse Monoclonal Antibody |
2 x 100 μl |
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APY03-Beads |
Anti-Phosphotyrosine Affinity Beads |
4 x 300 μl |
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APY03-HRP |
Anti-Phosphotyrosine-HRP Mouse Monoclonal Antibody |
1 x 100 μl |
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APY03-HRP-S |
Anti-Phosphotyrosine-HRP Mouse Monoclonal Antibody (Trial Size) |
1 x 25 μl |
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APY03-HRP-XL |
Anti-Phosphotyrosine-HRP Mouse Monoclonal Antibody |
Large Quantities |
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APY03-S |
Anti-Phosphotyrosine Mouse Monoclonal Antibody (Trial Size) |
1 x 25 μl |
SUMO化抗體
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ASM01 |
Anti-SUMO-1 Mouse Monoclonal Antibody |
1 x 100 μl |
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ASM01-S |
Anti-SUMO-1 Mouse Monoclonal Antibody (Trial Size) |
1 x 25 μl |
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ASM11-Beads |
SUMOylation-1 Affinity Beads |
3 x 400 μl |
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ASM23 |
Anti-SUMO-2/3 Mouse Monoclonal Antibody |
2 x 100 μl |
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ASM23-HRP-S |
Anti-SUMO-2/3-HRP labeled Mouse Monoclonal Antibody (Clone 12F3) |
1 x 25 μl |
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ASM23-HRP |
Anti-SUMO-2/3-HRP labeled Mouse Monoclonal Antibody (Clone 12F3) |
1 x 100 μl |
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ASM23-S |
Anti-SUMO-2/3 Mouse Monoclonal Antibody (Trial Size) |
1 x 25 μl |
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ASM24 |
Anti-SUMO-2/3 Mouse Monoclonal Antibody |
2 x 200 μl |
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ASM24-Beads |
SUMO-2/3 Affinity Beads |
2 x 400 μl |
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ASM24-S |
Anti-SUMO-2/3 Mouse Monoclonal Antibody (Trial Size) |
1 x 150 μl |
泛素化抗體
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AUB01 |
Anti-Ubiquitin Mouse Monoclonal Antibody |
2 x 100 μl |
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AUB01-HRP |
Anti-Ubiquitin-HRP Antibody |
1 x 100 μl |
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AUB01-HRP-S |
Anti-Ubiquitin-HRP Antibody |
1 x 25 μl |
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AUB01-S |
Anti-Ubiquitin Mouse Monoclonal Antibody (Trial size) |
1 x 25 μl |
|
AUB01-XL |
Anti-Ubiquitin Mouse Monoclonal Antibody |
4 x 500 μl |
其他相關(guān)試劑
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BLR01 |
BlastR Rapid Lysate Prep Kit |
50 purifications |
|
BLR02 |
BlastR Rapid Filtration Kit |
50 purifications |
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CIG01-beads |
Control for Immunoprecipitation IgG beads |
10 assays |
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CIG02-beads |
Control for Acetylation Immunoprecipitation IgG beads |
10 assays |
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CIG03-beads |
Control for SUM01 Immunoprecipitation IgG beads |
10 assays |
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CUB02-beads |
Control for Ubiquitin Affinity Beads |
10 assays |
|
UBA01-beads |
Ubiquitin Affinity Beads |
40 rxs |
全國(guó)免費(fèi)熱線：400 819 7199 （工作日：8:30 - 17:30） Email：bj_info@dakewe.net
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