l 說(shuō)明:
PVDF膜通常都需要酒精預(yù)濕(Prewet)、洗滌。這些操作一方面需在無(wú)菌條件下完成,過(guò)程繁雜;另一方面,洗滌如果不徹底,膜上殘留的乙醇對(duì)抗體的包被乃至后續(xù)細(xì)胞因子檢測(cè)等均有不同程度的影響。為了幫助廣大的ELISPOT實(shí)驗(yàn)操作人員減輕工作強(qiáng)度、節(jié)省寶貴的時(shí)間,同時(shí)也為了減少污染的機(jī)會(huì),達(dá)科為公司經(jīng)過(guò)不懈地努力與反復(fù)地驗(yàn)證,終于研發(fā)出了有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的PVDF膜ELISPOT包被抗體緩沖液Magi? Coating Buffer(貨號(hào)DKW01-0030),能夠免除酒精預(yù)濕和洗滌的步驟,同時(shí)有效保護(hù)包被抗體。
l 使用方法:
Magi? Coating Buffer的使用方法極簡(jiǎn)單:先取15μl Magi? Coating Buffer潤(rùn)濕PVDF孔,待孔完全潤(rùn)濕之后(只要Magi? Coating Buffer接觸到了孔底,會(huì)在2-3秒之內(nèi)完全潤(rùn)濕整個(gè)孔,膜的顏色變得透亮)然后加入50μl 經(jīng)PBS稀釋過(guò)的包被抗體,4?C包被過(guò)夜。見(jiàn)前面的“方案A Magi? Coating Buffer潤(rùn)濕包被程序”,這種方法省去了預(yù)濕之后的洗滌步驟,也能得到和傳統(tǒng)酒精預(yù)濕一樣的效果。
l 注意事項(xiàng):
2 抗體凍干粉仍然用去離子水溶解。千萬(wàn)不要用Magi? Coating Buffer來(lái)溶解凍干粉!
2 包被抗體應(yīng)該在使用前才稀釋,隨用隨稀釋。因?yàn)榭贵w稀釋之后,濃度變低,穩(wěn)定性下降。
2 4?C包被過(guò)夜(12-24小時(shí),通常18小時(shí))是經(jīng)過(guò)優(yōu)化的包被條件,我們不推薦室溫或者37?C的快速包被。
Magi? Coating Buffer 4?C可以保存一年,注意保持無(wú)菌。