細(xì)胞內(nèi)代謝在細(xì)胞發(fā)育分化和功能方面所起的調(diào)節(jié)作用已經(jīng)引起了研究者非常大的興趣。在巨噬細(xì)胞的研究中，經(jīng)典的M1型細(xì)胞的活化被發(fā)現(xiàn)依賴于糖酵解功能，而M2型巨噬細(xì)胞的極化近來被注意到似乎需要脂肪酸氧化（FAO）的作用。

脂肪酸氧化（Fatty Acid Oxidation,FAO）是指油脂水解產(chǎn)生的甘油和脂肪酸在供氧充足的條件下，可氧化分解生成二氧化碳和水，并釋放出大量能量供機(jī)體利用，過程可概括為活化、轉(zhuǎn)移、β氧化及最后經(jīng)三羧酸循環(huán)被徹底氧化生成CO2和H2O并釋放能量幾階段。脂肪酸氧化（FAO）需要肉堿酰基轉(zhuǎn)移酶(CPT)系統(tǒng)，包括一個轉(zhuǎn)運(yùn)體和兩個線粒體膜酶（CPT1和CPT2）。這個系統(tǒng)促進(jìn)了長鏈脂肪酸進(jìn)入線粒體基質(zhì)的運(yùn)輸，在那里它們可以被代謝產(chǎn)生ATP。

位于線粒體外膜(OMM)上的CPT1和位于線粒體內(nèi)膜(IMM)上的CPT2在將長鏈脂肪酸以?；o酶A形式運(yùn)輸?shù)骄€粒體基質(zhì)中的作用示意圖

為了評估脂肪酸氧化（FAO）在巨噬細(xì)胞中的功能，從野生型小鼠（control）和敲除編碼CPT2酶基因的小鼠（CPT2-M KO小鼠）體內(nèi)分別獲得骨髓來源的巨噬細(xì)胞（BMDMs）。野生型小鼠的BMDMs在加入脂肪酸后，基礎(chǔ)耗氧率（OCR）出現(xiàn)明顯的增加，加入CPT1酶抑制劑后，耗氧率升高現(xiàn)象消失。而KO小鼠在加入脂肪酸后，無論有沒有使用CPT1酶的抑制劑，耗氧率都沒有出現(xiàn)顯著的改變。所以正常的巨噬細(xì)胞是有執(zhí)行脂肪酸氧化的功能的，但是缺少CPT2或者抑制CPT1酶的巨噬細(xì)胞，細(xì)胞執(zhí)行脂肪酸氧化的功能缺失。
 

進(jìn)一步評估M2型巨噬細(xì)胞的極化與脂肪酸氧化的關(guān)系。取兩組小鼠的BMDMs在體外進(jìn)行M2的極化，分別加入IL-4培養(yǎng)后，收集兩組細(xì)胞，通過流式檢測M2巨噬細(xì)胞表面抗原CD301和CD206的含量發(fā)現(xiàn)WT和KO小鼠都出現(xiàn)了M2的極化，但是兩組小鼠M2含量并沒有出現(xiàn)顯著的差異。

在體內(nèi)誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)中也發(fā)現(xiàn)了相同的結(jié)果。給WT小鼠分別注射PBS和IL-4c（IL-4重組蛋白和IL-4單抗混合試劑），KO組小鼠進(jìn)行和WT一樣的處理。檢測兩組小鼠腹膜巨噬細(xì)胞的Arg1, Mgl2 和Retnla表達(dá)，兩組小鼠之間仍然沒有明顯的差異。
 

綜上，本次的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明不管是否具備脂肪酸氧化功能的細(xì)胞，都能在體內(nèi)外的實(shí)驗(yàn)中成功誘導(dǎo)M2型巨噬細(xì)胞。本次實(shí)驗(yàn)結(jié)合之前的研究說明M2型細(xì)胞極化對脂肪酸氧化（FAO）的需求比之前所認(rèn)為的更加復(fù)雜。仍然需要更多的研究來證實(shí)脂肪酸氧化（FAO）在巨噬細(xì)胞極化中是否具有相關(guān)或因果作用。

脂肪酸氧化（FAO）檢測相關(guān)產(chǎn)品的介紹

試劑盒特點(diǎn)：

• 檢測細(xì)胞和組織樣本中的FAO

• 快速：整個時間耗時2h左右

• 簡單：只需要3個組分三步操作即可完成實(shí)驗(yàn)

• 靈活：實(shí)驗(yàn)不需要特定的儀器，結(jié)果在492nm的讀板儀即可讀取

試劑盒參考文獻(xiàn)：

NMR-based serum and urine metabolomic profile reveals suppression of mitochondrial pathways in experimental sepsis-associated acute kidney injury.(2021)

試劑盒驗(yàn)證數(shù)據(jù)：

脂肪酸氧化試驗(yàn):從健康的倉鼠心臟和與心力衰竭相關(guān)的TO2倉鼠模型心臟制備組織裂解物。裂解物用于測定和脂肪酸氧化水平

文章參考文獻(xiàn)：

Fatty acid oxidation in macrophage polarization.(2016)

Adipose fatty acid oxidation is required for thermogenesis and potentiates oxidative stress induced inflammation.(2015)