酵母(Saccharomyce) 是基因克隆實驗中常用的真核生物受體細胞,也是遺傳學(xué)和分子生物學(xué)的重要研究材料,某些種屬如釀酒酵母還可作為重要的模式生物。
隨著現(xiàn)代生物提取技術(shù)的發(fā)展,酵母核酸應(yīng)用趨于廣泛,尤其在抗癌新藥、保健品及嬰幼兒食品等方面取得了不少突破,酵母核酸產(chǎn)業(yè)的發(fā)展將成為生物產(chǎn)業(yè)的一個亮點。那么問題來了,怎樣才能又快又好地從眾多復(fù)雜的生物學(xué)組分中將酵母核酸提取、純化出來呢?
今天小達君為大家?guī)淼谋闶墙湍负怂崽崛〉囊徽臼浇鉀Q方案——LGC(Lucigen)的兩款特色產(chǎn)品 :MasterPure? Yeast RNA Purification Kit和 MasterPure? Yeast DNA Purification Kit 。只需一個試劑盒,便可快速高效地從酵母和其他真菌中得到較純的DNA或者RNA。
MasterPure? Yeast DNA Purification Kit
應(yīng)用
該試劑盒可用于從念珠菌、酵母菌、畢赤酵母和裂殖酵母中分離高純度的DNA,純化得到的DNA可以用于下游的雜交、限制性內(nèi)切酶酶切、PCR擴增、二代測序?qū)嶒?。
此外,您也可以用于從絲狀真菌(如曲霉屬和青霉屬)中純化DNA ,用于真菌的鑒定和分型。
技術(shù)優(yōu)勢
與其它試劑盒相比具有較高的酵母DNA得率
40分鐘以內(nèi)即可獲得DNA
無需酶裂解、過柱子或使用酚和其它有機試劑提取,也不需要使用玻璃珠破碎
用事實說話,用效果正名~
圖1.MasterPure? Kit提取的DNA的大小分布
1%瓊脂糖膠電泳分析不同試劑盒提取純化啤酒酵母的500ng DNA,使用EB進行染色。用MasterPure? Kit分離的DNA的大小絕大多數(shù)在40-50 kb范圍內(nèi)。用其它試劑盒提取的DNA會降解成更小的片段。
泳道M : lambda DNA ladder;
泳道4 : T7 DNA (40 kb)
圖2、比較Master Pure? Kit和其它試劑盒的DNA得率
分別提取S.cerevisiae和C. albicans.中的DNA,用熒光染料33258對DNA進行定量分析(RNA對該定量幾乎沒有影響)。圖中顯示的是兩次實驗的平均DNA得率 。MasterPure Kit對C.albicans的提取量相比其它試劑盒高17倍;對S. cerevisiae的提取量相比其它試劑盒高12倍。
MasterPure? Yeast RNA Purification Kit
應(yīng)用
從酵母和絲狀真菌純化RNA用于cDNA合成和芯片表達譜分析。
技術(shù)優(yōu)勢
避免了熱、酸、酚,無需多余的酶或設(shè)備
比原生質(zhì)體提取法更快、比玻璃珠提取法效果更好
能夠從1ml對數(shù)期的釀酒酵母中得到25-50 μg RNA
給你一個選擇“我”的理由~
圖3.MasterPure? Yeast RNA Purification Kit提取RNA的芯片分析
RNA被反轉(zhuǎn)錄、標(biāo)記并與酵母DNA芯片雜交。Cy5標(biāo)記氧化應(yīng)激下細胞中的cDNA,對照細胞用Cy3標(biāo)記。
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 |
貨號 |
規(guī)格 |
品牌 |
MasterPure? Yeast DNA Purification Kit |
MPY80200 |
200 Purifications |
LGC(Lucigen) |
MasterPure? Yeast RNA Purification Kit |
MPY03100 |
100 Purifications |
LGC(Lucigen) |
*更多特色提取試劑盒,請檢索Lucigen官方網(wǎng)站:www.lucigen.com
LGC(Lucigen):Lucigen公司成立于1998年,提供各類用于分子生物學(xué)研究相關(guān)產(chǎn)品,可以使研究者成功克隆較難克隆的基因。2017年Lucigen收購了Epicentre Technologies基因組試劑盒、酶和輔助試劑等產(chǎn)品線,2018年又被英國LGC公司收購,公司合并后改名為 Biosearch technologies,專注于基因組學(xué)研究。目前產(chǎn)品線主要包括:體外轉(zhuǎn)錄、基因克?。?/span>BAC克隆試劑盒)、感受態(tài)細胞(TG1噬菌體文庫構(gòu)建感受態(tài))、體外擴增、轉(zhuǎn)座子突變、蛋白表達、核酸提取等。