隨著社會的急速發(fā)展,環(huán)境污染、食品安全等問題日益加劇,安全成為我們每天都在思考的問題。
呃,小達開始陷入深深的沉思……
忙于科研事業(yè)的實驗汪們每天都有可能接觸有毒有害試劑,即使全副武裝小心翼翼,還是有踩雷的時候。好吧,既然實驗不可避免,我們大可以選擇相對安全的產(chǎn)品。
簡單來說,就是小達要給大家推薦一款真正安全無毒的核酸染料,來自達優(yōu)的SpectRedNucleic Acid Dye(貨號:8062041),簡稱ND4。
產(chǎn)品特點:
高靈敏度:靈敏度至少是溴化乙錠(EB)的4倍,背景更低;
高安全性:不能透過細胞膜,誘變性遠小于EB,安全無毒,無致癌性;
高穩(wěn)定性:室溫下在酸性或堿性緩沖液中穩(wěn)定;
與EB有相同光譜特性,可檢測單鏈或雙鏈的DNA或RNA。
如何做到真正的安全無毒?揭秘來了~
我們從兩方面入手,一是分子量。ND4的分子量約為1400,是油性大分子染料,不能穿過細胞膜上的通道;
圖3. 分子量小于600的分子可自由通過細胞膜,分子量大于600的分子不可自由通過細胞膜。
圖4. ND4的質(zhì)譜圖譜,顯示分子量在1400左右。
第二,基于同性電荷相互排斥的原理,ND4帶4個正電荷,與細胞膜外的正電荷相互排斥,染料不能進入胞內(nèi),也就對人體沒什么危害。
對細胞的穿透性:ND4是油性大分子核酸染料,并帶有正電荷,不能穿透細胞膜。而EB和SYBR都可以穿透細胞膜,對核酸進行染色。
圖5. 不同種類核酸染料對細胞穿透性實驗結(jié)果。
在37℃條件下,HeLa細胞在1×EB、1×SYBR和1×ND4,分別孵育5min、10 min或30 min。
ND4使用方法(泡染):
按照常規(guī)方法進行制膠電泳。將SpectRed Nucleic Acid Dye(10,000×)稀釋約3300倍到0.1 M的NaCl溶液中,制成3×染色液(30 μL10,000×染料和10mL 1 M NaCl加到90mLddH2O 中);
將凝膠浸沒在3×染色液中,可放搖床上或靜置染色約30 min左右,最佳染色時間根據(jù)凝膠厚度及瓊脂糖濃度不同而略有不同。對于3.5%-10%丙烯酰胺膠,染色時間通常介于30min到1h。使用凝膠成像系統(tǒng)觀察結(jié)果。
相關產(chǎn)品信息:
達科為生物工程有限公司作為達科為集團全資子公司,是一家國家高新技術企業(yè)。目前開展臨床和科研產(chǎn)品研發(fā)和生產(chǎn)??蒲挟a(chǎn)品包括分子生物學、細胞培養(yǎng)和免疫診斷等產(chǎn)品。達科為生物工程不斷創(chuàng)新,推出快速凝膠試劑盒、PCR Mix、核酸染料、Marker系列產(chǎn)品、RNA提取試劑盒、逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)品、實時熒光定量產(chǎn)品、克隆試劑盒、膠回收試劑盒和質(zhì)粒提取試劑盒等系列達優(yōu)?分子產(chǎn)品。